使用奥林巴斯 CKX53 显微镜观察干细胞大小形态，以下是具体的步骤和要点：

奥林巴斯 CKX53 显微镜前期准备

1.样本准备：将培养的干细胞进行处理，制成适合观察的样本。如果是贴壁生长的干细胞，需要用等消化液将细胞从培养皿壁上消化下来，制成细胞悬液；如果是悬浮生长的干细胞，则可直接取适量细胞悬液进行观察。将细胞悬液滴在载玻片上，盖上盖玻片，尽量避免产生气泡。

2.显微镜调试：接通奥林巴斯 CKX53 显微镜的电源，打开光源，调节亮度旋钮，使光线强度适中。将低倍物镜（如 10×）对准载物台的通光孔，转动粗准焦螺旋，使载物台上升到适当位置。

奥林巴斯 CKX53 显微镜观察步骤

1.低倍镜初步观察：将制备好的干细胞样本放在载物台上，用压片夹固定。通过目镜观察，同时转动粗准焦螺旋，缓慢下降载物台，直到看到清晰的细胞图像。在低倍镜下，观察干细胞的整体分布情况，找到细胞分布较为均匀且密集的区域，初步判断干细胞的大小范围和大致形态，例如是圆形、椭圆形还是其他形状。

2.高倍镜详细观察：将低倍镜下选定的区域移至视野，转换到高倍物镜（如 40× 或更高倍数）。此时只能使用细准焦螺旋来微调焦距，以获得更清晰的干细胞图像。在高倍镜下，仔细观察干细胞的形态细节，包括细胞膜是否光滑、细胞质的均匀程度、细胞核的形状和大小等。注意观察细胞是否有突起、伪足等特殊结构，以及细胞之间的连接方式。

3.大小测量（可选）：如果需要准确测量干细胞的大小，可以使用显微镜自带的测微尺。将测微尺放置在载物台上，在高倍镜下校准测微尺的刻度。然后将测微尺与干细胞图像重叠，通过测量干细胞在测微尺上所占的刻度，计算出干细胞的实际大小，通常可以测量细胞的直径或长轴、短轴的长度等。

4.记录与分析：使用显微镜自带的成像系统或连接的相机，拍摄干细胞的图像，以便后续进一步分析和对比。对观察到的干细胞大小和形态特征进行记录和描述，可以统计不同形态细胞的比例，分析细胞大小的分布情况等。

奥林巴斯 CKX53 显微镜注意事项

1.样本制备过程要轻柔，避免对细胞造成损伤，影响观察结果。

2.调节焦距时要缓慢操作，特别是在高倍镜下，防止物镜与样本碰撞。

3.观察过程中保持显微镜的稳定，避免外界震动干扰观察。

4.由于干细胞的形态可能会受到培养条件等因素的影响，因此在观察时要记录好样本的来源、培养条件等信息，以便综合分析观察结果。